Desarrollo de anticuerpos monoclonales y policlonales

Desde hace unas décadas, el uso de anticuerpos, tanto monoclonales como policlonales, se ha generalizado en los laboratorios de todo el mundo. La adaptabilidad de estas herramientas biológicas a diversas aplicaciones hace que intervengan en un gran número de los procesos que se desarrollan en los laboratorios de investigación, y en los departamentos de I+D de muchas instituciones.   

Producción de anticuerpos a medida

Nuestra experiencia de 15 años en el desarrollo personalizado de anticuerpos para nuestros clientes nos ha permitido participar en la realización de unos 150 de estos procesos. A su vez, nos han enfrentado a diversos retos que han llevado a la creación de una larga lista de servicios relacionados con dichos desarrollos. Nuestra cartera de servicios de anticuerpos incluye la conjugación de anticuerpos, la fragmentación, la producción a escala, el desarrollo de inmunoensayos, etc. 

  • Generación de Anticuerpos

  • Validación de Anticuerpos

  • Desarrollo de herramientas de diagnóstico e investigación

Anticuerpos policlonales

Nuestro servicio de desarrollo de anticuerpos policlonales incluye la producción de anticuerpos policlonales personalizados en conejos. Durante el proceso correspondiente, trabajaremos con nuestros clientes, y ajustaremos nuestros protocolos, probados en cientos de casos, hasta que se adapten perfectamente a las necesidades del cliente. Este proceso no sólo incluirá el diseño del antígeno más adecuado para un determinado servicio, sino también la síntesis del péptido y el protocolo de inmunización de los animales. Tras estos pasos, se llevará a cabo la purificación y el control de calidad de los anticuerpos mediante una prueba ELISA.

Anticuerpos policlonales de Conejo

Dependiendo de con qué quiera trabajar el cliente, adaptamos el más adecuado, desde simples secuencias de péptidos diana hasta el ADNc del cliente, utilizado como base, si está disponible.

Además, contamos con un protocolo de inmunización estandarizado y ampliamente probado, que nos facilita el conocimiento del comportamiento y tipo de Igs prioritarias que más nos pueden interesar y que nos permite explorar el sistema inmune del animal para adaptar esa respuesta al uso técnico para el que se ha diseñado el proceso.


Purificación (proteína A/G) de los anticuerpos

Un factor importante a destacar es la inclusión en nuestro servicio de la purificación (Proteína A/G) de los anticuerpos a partir del suero de los animales.

Esta purificación permite a los clientes alcanzar sus objetivos trabajando desde el principio con material completamente establecido y, lo que es más importante, nos proporciona versatilidad en otros servicios que pueden ayudarles.

Por ejemplo, la purificación por afinidad de Ag específicos, marcados en diferentes fluorocromos/enzimas, modificaciones posteriores de anticuerpos, etc. Son servicios adicionales que garantizan una asistencia integral y totalmente personalizada. 

1  |  Antigen

2  |  Immunization

3  |  B-Lymphocyte clone

4  |  Varied epitopes of the same antigen recognised by diverse lymphocyte clones.

5  |  Clonal response of B Lymphocytes

6  |  Polyclonal antibody preparation

  • 1  |  Antigen

  • 2  |  Immunization

  • 3  |  B-Lymphocyte clone

  • 4  |  Varied epitopes of the same antigen recognised by diverse lymphocyte clones.

  • 5  |  Clonal response of B Lymphocytes

  • 6  |  Polyclonal antibody preparation

Estamos deseando conocer las necesidades de su investigación

Anticuerpos fosfoespecíficos

El trabajo con nuevas proteínas y los avances en los descubrimientos de funcionalidad hacen que, en ocasiones, sea necesario diferenciar la activación/funcionalidad de los marcadores. Las modificaciones postraduccionales en las proteínas, especialmente la fosforilación de las mismas, están implicadas en la mayoría de los procesos celulares y esto hace que su estudio sea esencial en el desarrollo de nuevas estrategias respecto a numerosas enfermedades humanas.

Nuestro sistema de purificación de anticuerpos fosfoespecíficos puede detectar fosforilaciones específicas en proteínas a partir de mezclas celulares complejas de alta sensibilidad y especificidad.

Anticuerpos Monoclonales

Durante los últimos 15 años, Immunostep ha generado decenas de proyectos en los que el desarrollo de anticuerpos monoclonales de ratón ha sido la clave para que nuestros clientes alcancen sus objetivos. Podemos garantizar anticuerpos de alta afinidad y alta especificidad que ayudarán a nuestros clientes a conseguir los objetivos de su investigación. Encontraremos la solución que necesitan a partir de una gran variedad de antígenos, que pueden ser desarrollados internamente, o a partir de los desarrollos previos de los clientes.

Utilizando proteínas como antígenos, podemos obtener anticuerpos monoclonales contra los epítopos conformacionales de la proteína objetivo. Esto maximizará las posibilidades de que el anticuerpo se una a la proteína nativa en una mayor gama de aplicaciones. Así, sólo a partir de la secuencia de esta proteína diana, podemos llevar a cabo todo el proceso internamente, y controlar y diseñar la cadena completa de desarrollo junto con el cliente.

Fase 1: Estudio y proceso de inmunización

Es la fase clave de todo el proceso. En ella se establecen las necesidades del cliente, y posteriormente se diseña todo el proceso para obtener tanto el antígeno ideal para el desarrollo como los puntos de control. El periodo de inmunización variará de 30 a 90 días según las necesidades.

  • Protocolo estándar o diseño personalizado.
  • Número de animales: 5 ratones Balb/c.
  • Sangrado intermedio para el control de la inmunización.
Fase 2: Fusión celular, selección y primer cribado

Se utiliza una línea celular murina SP2 para obtener cientos de clones mediante la unión de los esplenocitos de animales inmunizados. Estos clones proporcionarán un punto de partida para trabajar en la localización del anticuerpo requerido por el cliente.

  • ELISA convencional y/o WB para el cribado
  • Validación con el inmunógeno
  • ELISA de captura
  • ELISA competitivo
  • Cribado FACS
  • Existen otros tipos de cribado adicionales
Fase 3: Clonación y segundo cribado

Una vez localizados estos anticuerpos/clones, comenzaremos a trabajar en ellos para ajustar el anticuerpo, ahora una herramienta para el investigador.

Entrega de sobrenadantes al cliente y selección consensuada de los clones candidatos. Los clientes hacen su elección en función de sus propias pruebas.

Fase 4: Estabilización y criopreservación. Caracterización de los clones seleccionados.

Pruebas como el isotipo de Ig, pruebas de micoplasma, etc.

  • Fase 1: Estudio y proceso de inmunización

    Es la fase clave de todo el proceso. En ella se establecen las necesidades del cliente, y posteriormente se diseña todo el proceso para obtener tanto el antígeno ideal para el desarrollo como los puntos de control. El periodo de inmunización variará de 30 a 90 días según las necesidades.

    • Protocolo estándar o diseño personalizado.
    • Número de animales: 5 ratones Balb/c.
    • Sangrado intermedio para el control de la inmunización.
  • Fase 2: Fusión celular, selección y primer cribado

    Se utiliza una línea celular murina SP2 para obtener cientos de clones mediante la unión de los esplenocitos de animales inmunizados. Estos clones proporcionarán un punto de partida para trabajar en la localización del anticuerpo requerido por el cliente.

    • ELISA convencional y/o WB para el cribado
    • Validación con el inmunógeno
    • ELISA de captura
    • ELISA competitivo
    • Cribado FACS
    • Existen otros tipos de cribado adicionales
  • Fase 3: Clonación y segundo cribado

    Una vez localizados estos anticuerpos/clones, comenzaremos a trabajar en ellos para ajustar el anticuerpo, ahora una herramienta para el investigador.

    Entrega de sobrenadantes al cliente y selección consensuada de los clones candidatos. Los clientes hacen su elección en función de sus propias pruebas.

  • Fase 4: Estabilización y criopreservación. Caracterización de los clones seleccionados.

    Pruebas como el isotipo de Ig, pruebas de micoplasma, etc.

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