BasoStep:

Determinación de la activación tras la estimulación con alérgenos mediante Citometría de Flujo

Determinación de reacciones alérgicas mediadas por IgE mediante el análisis de la superficie del antígeno CD63 en basófilos tras la estimulación con alérgenos utilizando Citometría de Flujo.

  • No expone al paciente a ningún alérgeno;

  • Determinación más específica de los basófilos que otras pruebas;

  • Simple y rápido: contiene controles positivos y negativos en tubos liofilizados, para una fácil manipulación;

  • 3 soluciones diferentes en función de las necesidades clínicas.

Kit de activación de basófilos

Kit de diagnóstico para la determinación cuantitativa de la degranulación de granulocitos basófilos en sangre total humana heparinizada. Utilizando alérgenos definidos, esta prueba proporciona información relativa a los trastornos alérgicos mediados por IgE a través del antígeno CD63 como marcador de la activación de los basófilos.

En las personas susceptibles, los linfocitos B producen IgE en respuesta a antígenos específicos como alimentos, pólenes, látex y fármacos. Esta IgE específica de antígeno (o alérgeno-específica) circula en el suero y se une a receptores de IgE de alta afinidad en células efectoras inmunitarias como los mastocitos localizados por todo el cuerpo.

Tras una exposición posterior al mismo alérgeno, los receptores de IgE se entrecruzan e inician eventos de señalización que desencadenan la degranulación de los mastocitos y una respuesta alérgica inmediata, de ahí el término hipersensibilidad inmediata.

¿Por qué analizar la superficie del antígeno CD63 en los basófilos?

El kit se basa en el método descrito por Sainte-Laudy et al. (1994), en el que la activación de los basófilos por alergenos se detecta mediante Citometría de Flujo y se mide por el aumento de CD63 (gp53) en la superficie celular. BasoStep permite la determinación cuantitativa de la degranulación de los basófilos humanos.

Se sabe que los basófilos son una fuente temprana y abundante de citocinas Th2 y otros mediadores de la inflamación Th2.

Debido a la sensibilización de los basófilos con IgE específica de alérgenos, representan una población efectora importante en la patogénesis alérgica.

Cada vez se reconoce más su capacidad para modular la inmunidad adaptativa.

Select the population of R2, which contains the population of basophils.

Using the fluorescence intensity of CD63 analyze the results.

The histogram is a representation of a lysate normal whole blood sample gated on CD123+/CD203c+/HLA-DR-. Control Negative are represented by the purple histogram and Positive Control  by blue histogram.

Determinación más específica de los basófilos que otras pruebas

El ensayo incluye el péptido quimiotáctico N-formil-Met-Leu-Phe (fMLP) como control positivo y un cóctel de anticuerpos para la detección y determinación de la activación de los basófilos degranulados.

Por lo tanto, el ensayo BasoStep se basa en la estimulación in vitro de los basófilos utilizando fMLP como control positivo y el posterior análisis por Citometría de Flujo de la expresión de membrana de CD63 en los basófilos tras la degranulación.

Rendimiento del Kit BasoStep:

Utilizando alérgenos definidos, esta prueba puede proporcionar información altamente fiable sobre la capacidad de liberación de los basófilos portadores de IgE.

Cuando los receptores IgE de los basófilos se reticulan con un alérgeno, las células sufren una degranulación a través de gránulos citoplasmáticos que contienen la proteína transmembrana CD63 que se fusionan con la membrana plasmática y liberan mediadores inflamatorios. Por lo tanto, el antígeno CD63 se expone como un marcador de la activación de los basófilos.

El histograma corresponde al análisis de una muestra de sangre de un individuo sano utilizando BasoStep. Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63, podemos analizar los resultados.

REFERENCIAS DE PRODUCTO
ReferenciaDescripción
BSTP-100T

Staining reagent: CD63 FITC, CD203c PE, HLA-DR PERCP, CD123 APC. Positive Control. Estimulation Buffer | Descargar TDS

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