Las columnas de exclusión por tamaño reutilizables de Immunostep permiten aislar rápidamente vesículas extracelulares (EVs) de sobrenadantes de cultivos celulares y fluidos biológicos complejos. Cada columna elimina eficazmente proteínas de fondo, lípidos, solutos y otros contaminantes para mejorar la sensibilidad y precisión de los ensayos posteriores (por ejemplo, TRPS, perfilado de proteínas, perfilado de ARN, etc.), manteniendo al mismo tiempo las propiedades biológicas de las EVs. Las vesículas se aíslan en 15 minutos, lo que permite recoger muestras y analizarlas inmediatamente. Las columnas están disponibles en stock y su calidad está garantizada, por lo que sus aislamientos son reproducibles de una columna a otra.
Figura 1: (A) Cantidad de EVs y proteínas en cada fracción de la columna. Comparación del contenido de proteínas (BCA) frente al de vesículas (FACS CD63+/CD9+). (B) Análisis por Citometría de Flujo de las fracciones de elución. Índice de tinción = (MFI positivo-MFI fondo 2σ fondo) (C) Las fracciones Western Blot SEC se cargaron en SD-PAGE y se sometieron a inmunotransferencia para tetraspanina CD9 con anti-CD9 (VJ1/20), en condiciones sin reducción.