REFERENCIAS DE PRODUCTO
| Product name | Reference | Description | |
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CAR T Detection | Human PE-CD19 | RUO | 25 test | Ir a la tienda | |
CAR T Detection | Human PE-CD19 | RUO | 100 test | Ir a la tienda |
La terapia con células CAR T se basa en la extracción de linfocitos T del paciente, la introducción de un Receptor Antígeno Quimérico (CAR) específico de una proteína presente en las células cancerosas (por ejemplo, CD19) y la consiguiente reinfusión de estas células modificadas, ahora llamadas células CAR T, en el paciente para que reconozcan las células diana y las eliminen.
Esta terapia ha cobrado relevancia por su eficacia, por lo que las herramientas de detección de células CAR T se han convertido en una necesidad crítica, tanto para comprobar que han sido modificadas correctamente como para monitorizarlas tras la reinfusión, ya que tienen una vida útil limitada.
Figura 1: Esquema básico de la terapia con células CAR T. (A) La célula T propia no reconoce la célula cancerosa. (B) Extracción de la célula T. (C) Modificación de la célula T con CAR. (D) Cultivo y recolección de células CAR T. (E) Las células CAR T recolectadas se reinfunden en el paciente. (F) La célula CAR T reconoce y elimina la célula cancerosa.
Una solución diferencial
Identifica células CAR T de otras poblaciones con alta resolución, incluso con muestras difíciles
Fluorocromo compatible con
cualquier Citómetro de Flujo (R-PE)
Compatible con paneles de
más de 30 anticuerpos
Existen algunos reactivos para identificar y cuantificar las células CAR T, basados en CD19 recombinante marcado con fluorescencia (PE o FITC). Sin embargo, los reactivos actuales presentan limitaciones a la hora de separar con sensibilidad las poblaciones deseadas, lo que dificulta a los analistas la obtención de un resultado preciso y fiable.
Los reactivos que superan este problema tienen la desventaja de implicar protocolos más complejos y lentos, utilizando un reactivo de amplificación además de la proteína. Por lo tanto, es necesario introducir nuevos reactivos simples, sencillos y fáciles de usar que sean capaces de discriminar claramente las células CAR T del resto de poblaciones para obtener un análisis más fiable.
Figura 2: Protocolo FACS (Fluorescent-Activated Cell Sorting). Immunostep frente a competidores. Otros competidores requieren más pasos y reactivos (competidor 1) o protocolos más largos (competidor 2). Immunostep combina la simplicidad con la rapidez, proporcionando a los analistas un protocolo más sencillo.
Detección de células CAR T
Para satisfacer estas necesidades, hemos desarrollado un reactivo único para el reconocimiento directo y específico de las células CAR T con alta resolución. Este reactivo permite a los especialistas confirmar la modificación exitosa de los linfocitos T en un control de calidad previo a la infusión en el paciente y monitorizarlos después de este paso.
TECNOLOGÍA
La proteína CD19 recombinante Fc-Tag (CD19p) ha sido marcada, mediante un proceso propio, con el fluorocromo R-Ficoeritrina (R-PE o PE), obteniendo un conjugado que es capaz de ser reconocido por las células CAR T y las separa eficientemente sin ningún reactivo secundario (Immunostep, ref. 19-0212).
Otros fabricantes disponen de productos similares basados en este complejo fluorocromo-proteína pero presentan limitaciones en la separación debido a las técnicas de bioconjugación y/o al fluorocromo utilizado.
BrightStepTM: nuestra tecnología de etiquetado patentada
Esta tecnología de vanguardia está llamada a redefinir la detección de células CAR T. Con BrightStep, hemos mejorado el arte del etiquetado, garantizando el mantenimiento de la conformación y las modificaciones naturales de la proteína. Esto significa una precisión sin precedentes sin necesidad de comprometer la integridad de la muestra.
Verificado mediante rigurosas pruebas de Citometría de Flujo, Brightstep ofrece un mayor rendimiento en especificidad y sensibilidad. Puede confiar en su fiabilidad para obtener resultados precisos en todo momento.
Además, gracias a la consistencia y reproducibilidad entre lotes, puede confiar en BrightStep para garantizar resultados fiables en sus necesidades de investigación y diagnóstico.
Experimenta el futuro de la detección de células CAR T con BrightStep, donde la innovación se une a la precisión.
Figura 4: Representación de la modificación de la célula T a célula CAR T y la estructura CAR de Yescarta y Kymriah. La célula T se transfecta con un vector viral que contiene la información para expresar el CAR. Éste se compone de un dominio extracelular que reconoce específicamente el antígeno CD19, diseñado a partir de un anticuerpo (FMC63), y otros dominios transmembrana e intracelulares con funciones señalizadoras y coestimuladoras que aumentan la eficacia del reconocimiento y la activación de la célula T.
COMPARATIVA ENTRE SOLUCIONES
El fundamento de la citometría de flujo es unir el reactivo a una población específica y discriminarla por la fluorescencia del reactivo. El reactivo se dirige al CAR en la célula T modificada, por lo que la separación depende del nivel de expresión del CAR y de la capacidad discriminatoria del reactivo. El reactivo identifica la población específica por su fluorescencia, pero no es tan importante la intensidad de esa fluorescencia, medida como MFI (Median Fluorescence Intensity), sino la capacidad de discriminar entre la población positiva (CAR T-Cells) y las poblaciones negativas (resto de las células).
Figure 5: Gráfico de barras que representa la relación entre Immunostep y los otros dos competidores. En la muestra C, la de más difícil discriminación (células CAR T académicas), Immunostep muestra la diferencia más alta, proporcionando un resultado fiable.
Significa que es necesaria la mayor diferencia entre ambas poblaciones MFI; este valor se conoce como Stain Index (SI), a mayor SI mejor discriminación. Un reactivo altamente fluorescente es necesario cuando la cantidad de molécula diana es baja pero a veces también aumenta la MFI negativa, empeorando el SI. Los mejores reactivos tienen un alto SI con una fluorescencia moderada o alta para identificar células CAR T, incluso con baja expresión de CAR.
Figura 6: Índice de Tinción, valor para estimar el nivel de discriminación entre poblaciones positivas y negativas.
STAIN INDEX = (Mediana de Positivos – Mediana de Negativos) / (SD de Negativos * 2).
