¿Por qué analizar la superficie del antígeno CD63 en los basófilos?
El kit se basa en el método descrito por Sainte-Laudy et al. (1994), en el que la activación de los basófilos por alergenos se detecta mediante Citometría de Flujo y se mide por el aumento de CD63 (gp53) en la superficie celular. BasoStep permite la determinación cuantitativa de la degranulación de los basófilos humanos.
Select the population of R2, which contains the population of basophils.
Using the fluorescence intensity of CD63 analyze the results.
The histogram is a representation of a lysate normal whole blood sample gated on CD123+/CD203c+/HLA-DR-. Control Negative are represented by the purple histogram and Positive Control by blue histogram.
Determinación más específica de los basófilos que otras pruebas
El ensayo incluye el péptido quimiotáctico N-formil-Met-Leu-Phe (fMLP) como control positivo y un cóctel de anticuerpos para la detección y determinación de la activación de los basófilos degranulados.
Por lo tanto, el ensayo BasoStep se basa en la estimulación in vitro de los basófilos utilizando fMLP como control positivo y el posterior análisis por Citometría de Flujo de la expresión de membrana de CD63 en los basófilos tras la degranulación.
Rendimiento del Kit BasoStep:
Utilizando alérgenos definidos, esta prueba puede proporcionar información altamente fiable sobre la capacidad de liberación de los basófilos portadores de IgE.
Cuando los receptores IgE de los basófilos se reticulan con un alérgeno, las células sufren una degranulación a través de gránulos citoplasmáticos que contienen la proteína transmembrana CD63 que se fusionan con la membrana plasmática y liberan mediadores inflamatorios. Por lo tanto, el antígeno CD63 se expone como un marcador de la activación de los basófilos.
El histograma corresponde al análisis de una muestra de sangre de un individuo sano utilizando BasoStep. Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63, podemos analizar los resultados.