Desarrollo de Anticuerpos Monoclonales y Policlonales
En las últimas décadas, el uso de anticuerpos monoclonales y policlonales se ha generalizado en los laboratorios de todo el mundo. La adaptabilidad de estas herramientas biológicas a diversas aplicaciones hace que intervengan en un gran número de los procesos que se desarrollan en los laboratorios de investigación y en los departamentos de I+D de muchas instituciones.
Anticuerpos Policlonales de conejo
Dependiendo de con qué quiera trabajar el cliente, adaptamos lo más adecuado, desde secuencias peptídicas diana sencillas hasta el ADNc del cliente, utilizado como base, si está disponible.
Además, tenemos estandarizado un protocolo de inmunización ampliamente testado a través de nuestra experiencia, que nos facilita el conocimiento del comportamiento y tipo de Igs prioritarias que más nos pueden interesar y que nos permiten explorar el sistema inmune del animal para adaptar esa respuesta al uso técnico para el que se ha diseñado el proceso.
Además de la estrecha relación de nuestro equipo con el investigador, otro factor importante es la inclusión en nuestro servicio de la purificación (Proteína A/G) de los anticuerpos a partir del suero de los animales.
Esta purificación permite a los clientes alcanzar sus objetivos trabajando desde el principio con material completamente establecido y, lo que es más importante, nos proporciona versatilidad en otros servicios que pueden ayudarles.
Por ejemplo, purificación por afinidad de Ag específicos, marcados en diferentes fluorocromos/enzimas, modificaciones posteriores de anticuerpos, etc. Son servicios adicionales que aseguran una asistencia integral y totalmente personalizada.
Anticuerpos Fosfoespecíficos
El trabajo con nuevas proteínas y los avances en los descubrimientos de funcionalidad hacen necesario en ocasiones diferenciar la activación/funcionalidad de los marcadores. Las modificaciones postraduccionales en las proteínas, especialmente la fosforilación de las mismas, están implicadas en la mayoría de los procesos celulares y esto hace que su estudio sea esencial en el desarrollo de nuevas estrategias con respecto a numerosas enfermedades humanas.
Nuestro sistema de purificación de anticuerpos fosfoespecíficos puede detectar fosforilaciones específicas en proteínas a partir de mezclas celulares complejas de alta sensibilidad y especificidad.
Anticuerpos Monoclonales
Durante los últimos 15 años, Immunostep ha generado decenas de proyectos en los que el desarrollo de anticuerpos monoclonales de ratón ha sido la clave para que nuestros clientes alcanzaran sus objetivos. Podemos garantizar anticuerpos de alta afinidad y alta especificidad que ayudarán a nuestros clientes a alcanzar con éxito los objetivos de su investigación. Encontraremos la solución que nuestro cliente necesita a partir de una gran variedad de antígenos, que pueden desarrollarse internamente o a partir de los desarrollos previos ya existentes.
Utilizando proteínas como antígenos, podemos obtener anticuerpos monoclonales contra los epítopos conformacionales de la proteína diana. Esto maximizará las posibilidades de que el anticuerpo se una a la proteína nativa en una mayor gama de aplicaciones. Así, partiendo únicamente de la secuencia de esta proteína diana, podemos llevar a cabo todo el proceso internamente, y controlar y diseñar toda la cadena de desarrollo junto con el cliente.
Phase 1: Study and Immunization protocol
It is the key phase in the entire process. Here the client’s needs are established, and subsequently the whole process is designed so as to obtain both the ideal antigen for the development and the control points. The immunisation period will vary from 30 to 90 days as needed.
- Standard protocol or customized design.
- Number of animals: 5 Balb/c mice.
- Intermediate bleeding for immunisation control.
Phase 2: Cell fusion, Selection and First Screening
An SP2 murine cell line is used to obtain hundreds of clones through thebinding of the splenocytes of immunised animals. These clones will provide a starting point for work on the localisation of the antibody required by the client.
- Conventional ELISA and/or WB for screening
- Validation with the immunogen
- Capture ELISA
- Competitive ELISA
- FACS screening
- Other additional types of screening are available
PHASE 3: Cloning and Second Screening
Once these antibodies/clones have been localised, we will begin to work on them in order to adjust the antibody, now a researcher’s tool.
Delivery of supernatants to the customer and consensual selection of the candidate clones. Customers make their choice according to their own tests.
PHASE 4: Stabilisation and Cryopreservation. Characterisation of the selected clones.
Tests such as Ig Isotyping, Mycoplasma tests etc.