La caracterización biológica de los exosomas requiere en la mayoría de los casos el aislamiento de exosomas intactos. En este sentido, se han desarrollado un gran número de métodos para el aislamiento de exosomas a partir de fluidos biológicos. En Immunostep ofrecemos algunas de las técnicas más comunes para el aislamiento de estas vesículas extracelulares con todas las garantías.
Gracias a nuestras tecnologías de vanguardia y a los años de experiencia en el campo, podemos aislar eficazmente exosomas de alta calidad a partir de una gran variedad de tipos celulares y múltiples fuentes de fluidos biológicos.
Aislamiento de EVs a partir de plasma mediante columnas Immunostep SEC. La muestra obtenida puede analizarse posteriormente mediante Abs (280) (Fig. A) y Abs (260/280) (Fig. B), lo que permite monitorizar la elución de la muestra, mediante citometría convencional con el uso de kits basados en esferas (Fig. C), como Exostep (Ref. ExoS-25-P81).
Se realizó una comparación utilizando columnas de la competencia, obteniendo las columnas de Immunostep un mejor rendimiento en términos de recuperación.
A) Comparación del diámetro de las partículas aisladas por tipo de columna. El valor D50 significa que el 50% de las partículas tienen ese diámetro o inferior.
B) Concentración (partículas/ml) obtenida a partir de la purificación de plasma (500 µl).
Una estrategia adecuada de gating FSC/SSC para un tamaño de microesferas de 6 micras y PerCP/APC, PerCP-Cy5/APC o PerCP-Cy5.5/APC ayuda a la identificación de la población de microesferas y a la discriminación de dobletes en el citómetro de flujo. Eche un vistazo a esta estrategia de puntos para la adquisición y el análisis de FSC frente a SSC (A) y PerCP frente a APC (B).
Eleva tu aislamiento de exosomas al siguiente nivel con las microesferas de captura superparamagnéticas de Immunostep:
Aislamiento específico de exosomas a partir de diferentes técnicas de purificación;
Sin enriquecimiento previo;
Totalmente compatible con análisis posteriores (WB, mRNA, miRNA, …).
Aumenta la sensibilidad en la detección de biomarcadores con este método rápido y sencillo:
Método sin ultracentrifugación para una detección de biomarcadores altamente sensible;
Preparación limpia de exosomas: reduce el arrastre de albúminas e inmunoglobulinas;
Obtén exosomas intactos, adecuados para una amplia variedad de aplicaciones sensibles a las proteínas.
Análisis NanoSight de los exosomas recuperados del plasma con la solución total de precipitación de exosomas. Las EVs recuperadas con el Reactivo de Precipitación (a partir de Plasma) tienen una distribución de tamaños similar a los aislados por otros métodos como la ultracentrifugación.